保存條件：X-gluc 干粉-20℃保存，其它組分 2-8℃保存，未開封保質期 24 個月。 

產品內容:

產品說明: 

     Gus (β-glucuronidase，β-D- 葡萄糖苷酸酶)基因是目前常用的一種報告基因，其表達產 物β-葡萄糖苷酸酶(GUS)是一種水解酶，能催化許多β-葡萄糖苷酯類物質的水解，它可以將 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯（x-gluc）分解為藍色的物質，其檢測方法簡單、快速、靈 敏、穩(wěn)定，且背景活性低。因為絕大多數植物細胞內不存在內源的 GUS 活性，因此 gus 基

因廣泛用作轉基因植物的報告基因，尤其是在研究外源基因瞬時表達的轉化實驗中廣泛應用。 

     本試劑盒包含 GUS 染色的全部試劑，使用方便，現(xiàn)將 X-gluc 溶劑加入 X-gluc 干粉內混 勻即為染色液濃縮液，再將染色液濃縮液和緩沖液按照比例混合即配成 GUS 染色液。

操作步驟： 

一、GUS 染色工作液配制： 

     1.將 X-gluc 溶劑室溫或 40℃水浴融化后，1mL 溶劑加入到 1 管 X-gluc 干粉中，震蕩混勻溶 解(易溶),即得 50×GUS 染色濃縮液。 

     注意：新鮮配置的染色濃縮液是無色的，-80℃可長期保存。-20℃保存 6-12 個月。溶液可 能會變粉色或者發(fā)紅，顏色較淺的可繼續(xù)使用，過深的應棄用。 

     2. 使用前 GUS 染色濃縮液用 GUS 染色緩沖液稀釋 50 倍，即配成 GUS 染色液。如 0.1mLGUS 染色濃縮液加入到 5mLGUS 染色緩沖液中混勻，即配成 5mLGUS 染色液。 

     注意：該染色液最好現(xiàn)用現(xiàn)配，可以-20℃保存 2-3 天。

二、GUS 染色步驟：

     1.預處理：將葉片、花瓣、根莖等組織剪成小片，放于 1.5ml 離心管中，加入預冷的 90%丙 酮完全覆蓋材料，常溫處理 20-30 分鐘。此步驟可以預固定組織并且可以去除部分葉綠素。 注：用于染色的植物材料的制備方法要因涉及的特定組織和器官的不同而異。例如，擬南芥 的根、花和葉片以及煙草幼苗的根就可以不作任何預處理而直接染色。但是像煙草和馬鈴薯 這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片（1-3mm）。當操作大的組織和樣品時，可以選 用真空滲入法來幫助底物滲入細胞。 

     2.染色：用蒸餾水將材料漂洗干凈后置于 1.5ml 離心管中；加入適量配制好的 GUS 染色工作 液至完全覆蓋材料；錫箔紙包好常溫過夜放置。 

     3.洗脫：用 25%, 50% 70%, 95%乙醇梯度洗脫，搖床輕搖每次 20 分鐘。 

     4.觀察：肉眼或顯微鏡下觀察，白色背景上的藍色小點即為 GUS 表達位點。